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R5421 酵母感受態(tài)細胞

簡要描述:R5421 酵母感受態(tài)細胞 保存條件:-80℃ 酵母促轉(zhuǎn)化劑 100μl -20℃畢赤酵母轉(zhuǎn)化液 5 ml 4℃

  • 產(chǎn)品型號:ABG709-50
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時間:2024-04-23
  • 訪  問  量:1877

詳細介紹

品牌Abnbio貨號ABG709-50
規(guī)格50X100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途感受態(tài)細胞應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,食品/農(nóng)產(chǎn)品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥

基因型

MATα ura3-52 leu2 trk1Δhis3Δ200 his4-15trk2Δ1::pCK64

 

簡單說明:

1、R5421釀酒酵母菌株為K+/鉀離子缺陷型菌株,在文獻中也稱為CY162,MATα型,多用于K+/鉀離子轉(zhuǎn)運蛋白的鑒定試驗中,也可用于K+/鉀離子通道或鈉鉀離子泵的鑒定試驗。Transformation marker為:ura3,leu2,該菌株可以在含有100mM KCl的培養(yǎng)基中正常生長,在含有5-10mMKCl的培養(yǎng)基中生長緩慢,當培養(yǎng)基中KCl濃度低于0.5mM,R5421(CY162)細胞停止生長。R5421感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,pGADT7質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>104 cfu/μg DNA。

 

操作說明

1、取一支無菌的1.5ml EP管,依次加入預冷的目的質(zhì)粒1-3µg,Carrier DNA 10µl(95-100 度5min 快速冰浴,重復一次),100µl冰上融化的感受態(tài)細胞,PEG/LiAc 500µl,輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次; 

2. 30℃水浴30min,每10min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;

3. 每支加入20µl的二甲基亞砜;(用于提高轉(zhuǎn)化效率,可不做)4. 42℃水浴15min,每5min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;5. 12000rpm瞬時離心棄上清,每支加入1ml的YPDPlus于30℃復蘇1h;(用于提高轉(zhuǎn)化效率,可不做)6. 12000rpm瞬時離心棄上清,用100µl 0.9%NaCl重懸,涂板,30℃培養(yǎng)48-96h。

 

注意事項

1、感受態(tài)細胞最好在冰上融化。

2. PEG溶液在低溫環(huán)境下會析出,請于常溫下溶解后使用。

 

 

 

 

 

 

 

 

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